在ELISA实验中，洗涤是实验操作多的一个步骤：通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体干扰物质。因此，不严格的洗涤容易出现交叉污染或洗不干净背景高。实验开始，上海轩泽康生物就试剂配置说明：配置时要用新鲜无污染的蒸馏水或去离子水现配现用，洗涤如果结晶应待其溶解后配置。
试剂的准备：20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
ELISA试剂盒洗板方法：
手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作注意事项如下：
1）垂直倒液，迅速、干脆，重复2-3次，不要手腕左右摇摆、旋转来倒液体。
2）倒液后将酶标板放在吸水纸拍干。用干净的滤纸，不要用卫生纸，因为细小粉尘或者碎屑容易吸附到孔底，导致洗板不干净，结果偏高或偏低，重复孔的数值也会相差很大。
3）每孔加300uL洗液，太多将溢出孔外污染相邻的孔。特别是每次洗板的两遍，若高浓度孔流串到低浓度孔或空白孔，其造成的交叉污染将无法洗掉，背景增高。
4）加入洗液浸泡30s。洗板时间太短，洗涤效果不佳。延长洗板时间和增加洗板次数可以使背景更干净。 
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